**行為及條件性行為敏感化效應(yīng)及其個(gè)體差異
**行為及條件性行為敏感化效應(yīng)及其個(gè)體差異
摘 要 目的:考察**處理下,大鼠行為敏感化及條件性行為敏感化效應(yīng)及其個(gè)體差異性表現(xiàn)。方法:根據(jù)大鼠在初次抵達(dá)的新穎環(huán)境中水平活動量的高低,將大鼠劃分為高反應(yīng)大鼠(High responder, HR)和低反應(yīng)大鼠(Lowresponder, LR)。應(yīng)用自動監(jiān)測大鼠活動箱,分別考察HR和LR大鼠在行為及條件性行為敏感化效應(yīng)形成及表達(dá)上的差異。結(jié)果: (1)連續(xù)5天**給藥,LR大鼠活動量顯著升高, HR大鼠無此效應(yīng); (2)條件測試日(第6天) ,給藥與環(huán)境匹配大鼠,活動量較給藥與環(huán)境非匹配組動物和對照組動物顯著為高;此效應(yīng)在HR和LR大鼠同時(shí)存在; (3)從給予**到給予鹽水LR大鼠活動量顯著下降,而HR大鼠活動量無顯著改變。結(jié)論:在連續(xù)給藥下,LR大鼠較HR大鼠,在行為敏感化效應(yīng)的形成中,具有更為顯著的效應(yīng),此效應(yīng)為LR動物對**更高的**效應(yīng),而非條件效應(yīng)所致。同時(shí)HR和LR大鼠都可以對**條件性線索產(chǎn)生應(yīng)答,產(chǎn)生條件性行為敏感化效應(yīng)。
關(guān)鍵詞 **,行為敏感化,條件性行為敏感化,個(gè)體差異。
1 引言
行為敏感化是成癮的重要行為反應(yīng),表現(xiàn)為在重復(fù)給藥下,動物表現(xiàn)出越來越高的精神興奮性運(yùn)動效應(yīng),這種越來越高的精神興奮性效應(yīng)的基礎(chǔ)是腦內(nèi)長時(shí)程的神經(jīng)適應(yīng)性改變(neuroadapta2tion),這種改變被認(rèn)為是產(chǎn)生**依賴和依賴后復(fù)吸的生物學(xué)基礎(chǔ)。
應(yīng)用***、****、**、酒精等成癮**對大鼠進(jìn)行重復(fù)給藥處理,可以導(dǎo)致動物出現(xiàn)行為敏感化效應(yīng),甚至在前處理(pretreatment)中只對動物進(jìn)行一次性給藥處理,動物在三周之后,依然可以出現(xiàn)行為敏感化效應(yīng)并伴隨以相應(yīng)的腦內(nèi)生化改變,例如在伏隔核(NucleusAccumbens, NAC)出現(xiàn)多巴胺(dopamine, DA)和乙酰膽堿神經(jīng)元的持續(xù)高反應(yīng)性。
在**成癮研究領(lǐng)域一個(gè)引人注目的事實(shí)是成癮行為效應(yīng)的個(gè)體差異。給予動物同樣的**處理,應(yīng)用不同的行為學(xué)模型,例如自我給藥模型(Self- administration, SA)
,條件性位置偏愛模型(Conditionedplacepreference, CPP),精神運(yùn)動興奮性模型(Locomotor activity, LA)等,都可以發(fā)現(xiàn)個(gè)體差異性的表現(xiàn)。
在以往關(guān)于行為敏感化及其個(gè)體差異的研究中,應(yīng)用**進(jìn)行行為敏感化個(gè)體差異研究的報(bào)告有限,而應(yīng)用**進(jìn)行條件性行為敏感化效應(yīng)個(gè)體差異的研究目前還未見報(bào)道。同時(shí)以往應(yīng)用精神興奮劑進(jìn)行的研究結(jié)果也呈現(xiàn)出一定的變異。例如Hooks等人發(fā)現(xiàn),通過動物在初次抵達(dá)的新穎環(huán)境中水平活動量的高低篩查出的高反應(yīng)大鼠(High
responders, HR)比低反應(yīng)大鼠(Low responders,LR)對****(AMPH)有著更為強(qiáng)烈的行為敏感化效應(yīng)。但是也有研究者發(fā)現(xiàn),LR大鼠的行為敏感化效應(yīng)更高。值得注意的是,上述研究結(jié)果都是在連續(xù)地給藥與環(huán)境相匹配的情況下獲得的,而在連續(xù)給藥和環(huán)境相匹配的情況下,動物較高的活動性可能同時(shí)存在著對**的無條件效應(yīng)和因給藥
與環(huán)境匹配而產(chǎn)生的激動性條件反射的成分。實(shí)驗(yàn)在連續(xù)5天給予**的情況下,在第6天給予動物鹽水,考察動物活動性的改變,以確定先天特征不同的大鼠,其對**和對給藥相關(guān)線索是否存在著差異性反應(yīng)?？紤]到**類**在亞洲的濫用,其成癮機(jī)制和精神興奮劑的不同,以及**類**在臨床上使用的一定的必要性,我們選擇**作為研究使用的**。
研究有下列三個(gè)主要研究目的: (1)考察在行為敏感化建立的過程中,具有先天不同運(yùn)動特征的HR和LR大鼠的行為敏感化效應(yīng); (2)考察**誘導(dǎo)的條件性行為敏感化行為的表達(dá)及此效應(yīng)在HR和LR大鼠間的異同; (3)考察HR和LR大鼠對**及**相關(guān)條件線索反應(yīng)的異同。
多數(shù)研究者認(rèn)為有**接觸史的動物或人,在納絡(luò)酮催癮情況下,或者在自然戒斷情況下出現(xiàn)軀體戒斷癥狀,可被視為形成軀體依賴。在本實(shí)驗(yàn)所應(yīng)用的成癮**劑量及時(shí)程下,在所有時(shí)點(diǎn)及自然戒斷情況下,均未出現(xiàn)軀體戒斷癥狀,因此可以認(rèn)為,本實(shí)驗(yàn)中接觸成癮**的動物并未形成軀體依賴狀態(tài)。
2 材料和方法
2. 1 實(shí)驗(yàn)動物及藥品
實(shí)驗(yàn)動物為雄性SD大鼠43只,起始體重400～480克(中國科學(xué)院遺傳研究所實(shí)驗(yàn)動物中心提供; 許可證號: 199036)。動物在50cm(長) ×2215cm(寬) ×30cm(高)的不銹鋼籠中群居飼養(yǎng),每箱8只動物,自由飲水進(jìn)食。光周期為8∶00(開)～20∶00(關(guān)),實(shí)驗(yàn)在光周期完成(10∶00～18∶00)。實(shí)驗(yàn)室溫度控制在20～22℃,相對濕度為40%左
右。正式實(shí)驗(yàn)開始前,提前3天使動物適應(yīng)實(shí)驗(yàn)主試人員的實(shí)驗(yàn)操作,排除非實(shí)驗(yàn)特異性的應(yīng)激因素。鹽酸**(Morphine HCL)由青海制藥廠提供,生理鹽水溶解,腹腔注射給藥(i. p. ),劑量為5mg/kg,**溶液及鹽水注射容量全部為1ml/kg。
2. 2 實(shí)驗(yàn)裝置及程序
2. 2. 1 大鼠在新穎環(huán)境中活動量測定 采用40cm(長) ×40cm(寬) ×35cm(高)的黑色有機(jī)玻璃運(yùn)動箱進(jìn)行大鼠精神興奮性運(yùn)動行為的測定。箱體四壁為磨砂面,底板為大小為1cm×1cm的柵格底面。動物在動物房適應(yīng)1周。正式實(shí)驗(yàn)開始后,將動物置于**進(jìn)入的運(yùn)動箱中,考察大鼠在60分鐘內(nèi)的自發(fā)活動量(根據(jù)攝像頭與監(jiān)測箱的距離和監(jiān)
測視野大小計(jì)算,每4個(gè)像素為1cm,以下皆以像素?cái)?shù)計(jì)算動物活動量)。根據(jù)此活動量,將高于和低于活動量中位數(shù)的50%大鼠定義為高運(yùn)動性大鼠(HR)和低運(yùn)動性大鼠(LR)。上述將動物按照50%為界,定義為HR和LR大鼠,并研究動物此種先天行為特征及其個(gè)體差異與成癮行為效應(yīng)關(guān)系的分類方法,已得到多數(shù)研究者的認(rèn)可。
2. 2. 2 大鼠行為敏感化及條件性行為敏感化測定裝置同“大鼠在新穎環(huán)境中活動量測定裝置”。測定分為行為敏感化形成的測試階段和條件性行為敏感化形成的測試階段。將HR和LR大鼠各分為3組,就給予**和環(huán)境是否匹配,將動物分成6組,分別為HR_匹配組(n=6),LR_匹配組(n=7),HR_非匹配組(n=7),LR_非匹配組(n=7), HR_對
照組(n=8),LR_對照組(n=8)。
正式實(shí)驗(yàn)開始后,從第1天到第5天為行為敏感化測試階段。對于匹配組動物,每天上午10點(diǎn),在測試箱中給予**,測試其60分鐘內(nèi)的活動量。晚8點(diǎn),匹配組動物在動物房飼養(yǎng)籠中給予鹽水。對于非匹配組動物,上午10點(diǎn)在測試活動箱中給予鹽水,測試其60分鐘內(nèi)的活動量。晚8點(diǎn),在動物房飼養(yǎng)籠中給予**。對照組動物,上午10點(diǎn)在測試活動箱中給予鹽水,測試動物在60分鐘內(nèi)的活動量。晚8點(diǎn),動物在動物房飼養(yǎng)籠中給予鹽水。
實(shí)驗(yàn)第6天, 6組動物分別給予和訓(xùn)練階段相同容量的生理鹽水注射,測試大鼠在60分鐘內(nèi)在測試箱中的活動量,此活動量為動物條件性行為敏感化的表達(dá)。
2. 3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
應(yīng)用two- wayANOVA重復(fù)測量方式統(tǒng)計(jì)HR和LR匹配大鼠在連續(xù)測量下形成的行為敏感化效應(yīng),應(yīng)用此統(tǒng)計(jì)方法考察從第1天到第2天給藥,從第5天給予**到第6天給予鹽水引起的動物活動量的改變。應(yīng)用單變量方差分析(one- wayANO2VA)方式考察在條件測試日(第6天)橫斷面上,匹配組、非匹配組、對照組動物的精神興奮性差異。應(yīng)
用單變量方差分析(one- wayANOVA)方式,統(tǒng)計(jì)在條件測試日(第6天)橫斷面上,在HR和LR內(nèi)部,匹配、非匹配、對照組動物的精神興奮性運(yùn)動的差異。
